紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)是基于紫外可見(jiàn)分光光度法原理，用來(lái)測(cè)量待測(cè)物質(zhì)對(duì)可見(jiàn)光或紫外光（200～760nm）的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器。可以測(cè)定核酸和蛋白的濃度，也可以測(cè)定細(xì)菌細(xì)胞密度。

 

紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的用途介紹：

 

1、對(duì)物質(zhì)進(jìn)行分析鑒定，紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)在制藥行業(yè)有著很大的前景。根據(jù)國(guó)內(nèi)外的書(shū)籍記載，已經(jīng)把很多的藥品紫外線(xiàn)吸收波長(zhǎng)和相對(duì)應(yīng)的詳細(xì)參數(shù)記錄起來(lái)，給藥品分析帶來(lái)了很大的方便。

 

2、對(duì)比分析，把需要測(cè)定的樣品與標(biāo)準(zhǔn)樣品放在同等環(huán)境下進(jìn)行測(cè)量。如果兩種樣品得到的檢測(cè)結(jié)果*一樣，就表明這兩種樣品是同種物質(zhì)。要是沒(méi)有標(biāo)準(zhǔn)樣品的話(huà)，可以選擇跟已知的標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)比分析，這種辦法對(duì)儀器的要求相當(dāng)高，檢測(cè)環(huán)境要求*。

 

3、在化學(xué)學(xué)科上的應(yīng)用，其可以檢驗(yàn)化學(xué)物質(zhì)的純度，同時(shí)也可以推算物質(zhì)的原子結(jié)構(gòu)，還可以對(duì)物質(zhì)之間的氫鍵進(jìn)行測(cè)定。特別是在有機(jī)化學(xué)方向的運(yùn)用，前景更是廣闊，能夠?qū)Τ煞直容^復(fù)雜的有機(jī)化合物進(jìn)行成分鑒定。

 

紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的主要指標(biāo)介紹：

 

(1)波長(zhǎng)范圍

波長(zhǎng)范圍是指儀器上、下限波長(zhǎng)之間的工作范圍，是與光源色器及檢測(cè)器的光譜響應(yīng)特性有關(guān)。有的儀器在波長(zhǎng)范圍兩端缺乏足夠的能量，難以正常工作。

(2)波長(zhǎng)準(zhǔn)確度

波長(zhǎng)準(zhǔn)確度是指儀器測(cè)定時(shí)標(biāo)稱(chēng)的波長(zhǎng)值與儀器出射的光線(xiàn)實(shí)際波長(zhǎng)值參考值或理論值）之間的符合程度，一般用多次波長(zhǎng)測(cè)量值平均值與參考值之差（即波長(zhǎng)誤差）來(lái)衡量。

(3)波長(zhǎng)重復(fù)性

波長(zhǎng)重復(fù)性是儀器在相同測(cè)試條件下、一個(gè)較短的時(shí)間內(nèi)，對(duì)同一吸收或發(fā)射譜線(xiàn)進(jìn)行連續(xù)多次波長(zhǎng)測(cè)量，測(cè)量結(jié)果的一致性。也稱(chēng)波長(zhǎng)精密度，即多次波長(zhǎng)測(cè)試數(shù)據(jù)的符合程度。波長(zhǎng)重復(fù)性一般用多次波長(zhǎng)測(cè)試數(shù)據(jù)的離散性，即取波長(zhǎng)準(zhǔn)確度多次測(cè)試結(jié)果中最大值與最小值之差來(lái)衡量。

(4)光譜帶寬

光譜帶寬指從經(jīng)過(guò)單色器后從出射狹縫出來(lái)的單色光的譜線(xiàn)輪曲線(xiàn)中峰高一半高度處的譜帶寬度。光譜帶寬可以表征儀器的光譜分辨率。光學(xué)帶寬越小越好，儀器一般可通過(guò)調(diào)窄狹縫，使光譜帶寬變小，但是同時(shí)光源能量弱，可能影響儀器對(duì)信號(hào)的檢測(cè)，降低儀器的靈敏度。光源輝線(xiàn)或一些較尖銳的吸光譜都可用于光譜帶寬的檢查。

(5)雜散光

雜散光是指到達(dá)檢測(cè)器的任何被測(cè)波長(zhǎng)以外的其它波長(zhǎng)的光。一般用在某規(guī)定的波長(zhǎng)下測(cè)定在理論上該波長(zhǎng)下*不吸收的某種標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的透射比來(lái)衡量。如紫外區(qū)可用Nal溶液測(cè)定波長(zhǎng)為220nm處的雜散光，在可見(jiàn)區(qū)可用各種有色玻璃截止濾光片。雜散光是光譜測(cè)量中誤差的主要來(lái)源。雜散光越小越好。

(6)分辨率

分辨率是指儀器對(duì)于緊密相鄰的峰可分辨的最小波長(zhǎng)間隔，是衡量分光光度計(jì)性能的重要指標(biāo)之一。單色器輸出的單色光的光譜純度、強(qiáng)度以及檢測(cè)器的光譜靈敏度等是影響儀器分辨率）主要因素。新版的檢定規(guī)程已取消分辨率要求，一般可用最小光譜帶寬來(lái)衡量。

(7)光度準(zhǔn)確度與透射比誤差

光度準(zhǔn)確度是吸光度測(cè)量的準(zhǔn)確程度，一般用透射比標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)實(shí)測(cè)吸光度值與其標(biāo)準(zhǔn)值之差（吸光度誤差）衡量。因?yàn)槲舛日`差在整個(gè)量程范圍內(nèi)的示值是非線(xiàn)性的》，因此用吸光度表示光度準(zhǔn)確度時(shí)，必須定其吸光度范圍。光度準(zhǔn)確度也可用透射比表示，即透射比準(zhǔn)確度，一般用透射比誤差（實(shí)測(cè)透射比值與其標(biāo)準(zhǔn)值之差）來(lái)衡量。透射比誤差是一個(gè)反映儀器綜合性能的指標(biāo)，與波長(zhǎng)準(zhǔn)確度、雜散光、儀器穩(wěn)定性等眾多因素有關(guān)。

(8)光度重復(fù)性與透射比重復(fù)性

光度重復(fù)性是在相同的儀器上、相同條件如儀器波長(zhǎng)、光譜帶寬不變，在短時(shí)間對(duì)同一樣品進(jìn)行多次重復(fù)測(cè)定吸光度，所測(cè)得值的一致性。光度重復(fù)性是影響分析結(jié)果可靠性的最主要因素，是關(guān)鍵性技術(shù)指標(biāo)，一般用多次重復(fù)測(cè)量吸光度的最大值與最小值之差來(lái)衡量。如按同樣方式測(cè)定透射比，即為透射比重復(fù)性。

(9)噪聲

噪聲是信號(hào)隨時(shí)間而無(wú)規(guī)則的變化。噪聲測(cè)量的方法是在儀器預(yù)熱穩(wěn)定后，在一定波長(zhǎng)和一定光譜帶寬下，分別掃描透射比100%或O透射比幾分鐘(一般取2min)，量取獲得圖譜中最大值至最小值之間的值作為絕D噪聲水平。如掃描較長(zhǎng)時(shí)間，一般30min，可獲得漂移。但在實(shí)際測(cè)定中，常用信噪比來(lái)描述儀的性能，如在100%線(xiàn)掃描時(shí)，噪聲是1%，則信噪比為100：1。這個(gè)指標(biāo)也是越小越好。

(1O)基線(xiàn)平直性

基線(xiàn)平直性是吸收池中不放任何東西時(shí)掃描基線(xiàn)(100%T線(xiàn)或OA線(xiàn)），基線(xiàn)傾斜彎曲的程度，它是儀器的重要性能指標(biāo)之一。一般用掃描圖譜中起點(diǎn)吸光度與偏離起點(diǎn)吸光度（取最大偏離點(diǎn)）之差來(lái)衡量。